液相色譜柱是液相色譜分離能力的核心部分,其化學性質參數包括以下幾個方面:
1、硅膠基質
硅膠基質是通用的基質,強度大,化學修飾容易,但使用的pH值范圍有限(一般為2—8,特殊修飾的可以達到1—12)。
2、聚合物基質
聚合物基質多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化學穩定,應用pH范圍寬,具有更強的疏水性,對蛋白質等樣品分離效果較好;但強度較小,有機溶劑可能導致聚合物溶脹而受損,批次重復性較差,商品化色譜柱不多,一般價格較貴。
3、載碳量
載碳量是基質表面鍵合相的比例,載碳量高,則保留增加,適合分析非極性化合物。
4、鍵合相
鍵合試劑不同,對化合物的選擇性不同,一般長鏈的烷基鍵合相(C18 C8)比短鏈的(C4 C3)穩定;非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩定。
5、封端
用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來,以減少殘留的硅醇基,減輕待測組分與酸性硅羥基反應而引起的色譜峰拖尾現象。尤其對于極性樣品而言,未封端處理的色譜柱分離效果較差。