賽默飛色譜柱損耗快?原因可能是臟了
為什么買的賽默飛色譜柱總是損耗得比較快呢?如果更換了不同品牌的柱子之后,仍然覺得賽默飛色譜柱的壽命表現均低于它們的普遍壽命。那就要看看是不是使用方法不當了哦。
自查:
1、是否使用同填料保護柱(相同品牌);
2、流動相從配置到棄用在 12 小時以內;
3、流動相瓶子嚴格清洗干燥,密封;
4、濾頭濾膜材質和品質是否選擇錯,注意查看是否使用后有溶解現象;
5、使用廠家推薦的沖洗方式沖洗賽默飛色譜柱。
以上自查項目改善后均不能解決,則采取第二步:
溝通廠家,建議寄回廠家進行賽默飛色譜柱“解剖”,月旭經過 10 多年專業“解剖”各種問題賽默飛色譜柱,總結得出可能原因如下:
原因是賽默飛色譜柱污染
可能的原因
1、樣品組分吸附在賽默飛色譜柱的前端
a、可能是由于樣品在流動相中的溶解度低而沉淀出來的
b、樣品中有強保留物質(與鍵合相極性相似的物質)
c、樣品或者流動相中與填料表面發生微弱的不可預知的化學反應
d、樣品溶劑本身的pH值在賽默飛色譜柱的耐受臨界值附近,而且進樣體積較大(內徑4.6mm,上樣體積在 50μl 以上)
通常這樣的情況伴隨柱壓升高;或者柱壓正常,一個色譜圖中有些峰形異常,有些峰形正常。
解決方法
a、 盡量從根源上解決問題,選擇合適的樣品前處理技術,去除掉強保留物質,獲得更加“干凈”更加成分單一的樣品;
b、 使用保護柱,保護柱的選擇盡量與分析柱同等填料,同等鍵合方法的保護柱,如果使用不同品牌填料、不同裝填工藝的保護柱,在分離能力和保護方面可能得不到好的效果,也不要使用更大粒徑的保護柱,更大粒徑或者裝填較差的保護柱會因為它的峰展寬作用而導致分離能力下降。
2、流動相“臟”了
流動相在賽默飛色譜柱中的使用量比樣品要大得多,不停的沖刷賽默飛色譜柱,如果流動相變質或者有其他的污染物,那對賽默飛色譜柱的污染會比樣品更大,賽默飛色譜柱對流動相反而是一種凈化,而且在運行梯度時,還會出現鬼峰。
解決方法
a、 流動相配置后盡快使用,多不超過 12 小時;
b、 有機相和鹽相混合的流動相,更容易導致鹽的析出,盡量使用在線混合,且在運行梯度時變化速率不宜太快,避免鹽析出;
c、 用專業的經過鈍化處理過的溶劑瓶裝流動相,切忌不能使用塑料瓶,做好密封,在更換流動相的時候同時更換試劑瓶;
d、 水在接觸空氣或者離開制水設備以后會出現變質,現用現制,打開后盡快使用。